{"id":14073,"date":"2021-03-22T08:37:24","date_gmt":"2021-03-22T08:37:24","guid":{"rendered":"https:\/\/dellait.com\/?p=14073"},"modified":"2021-05-12T11:03:13","modified_gmt":"2021-05-12T16:03:13","slug":"metodos-de-deteccion-de-paratuberculosis-de-vacuno-lechero","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/dellait.com\/es\/metodos-de-deteccion-de-paratuberculosis-de-vacuno-lechero\/","title":{"rendered":"Evaluaci\u00f3n de cepas de paratuberculosis en granjas de vacuno lechero"},"content":{"rendered":"

Maria Villagrasa & Nuria Garcia<\/strong><\/p>\n

La paratuberculosis bovina, tambi\u00e9n conocida como enfermedad de Johne, es una patolog\u00eda causada por la bacteria Mycobacterium avium<\/em> subsp. paratuberculosis<\/em> (MAP), que se caracteriza por una lesi\u00f3n intestinal cr\u00f3nica.<\/p>\n

Es una enfermedad de distribuci\u00f3n mundial y tiene un impacto econ\u00f3mico considerable en la producci\u00f3n<\/a><\/strong> debido a sus consecuencias en la disminuci\u00f3n de la producci\u00f3n lechera, mayor predisposici\u00f3n al desarrollo de otras patolog\u00edas o menor valor comercial de los animales. La infecci\u00f3n se transmite principalmente por contacto entre animales a trav\u00e9s de las heces<\/a> y por el consumo de calostro<\/a> o leche proveniente de un animal infectado.<\/p>\n

La presencia de MAP en la leche y los productos l\u00e1cteos es un problema de seguridad alimentaria<\/strong> debido a su posible relaci\u00f3n con diversas enfermedades humanas, como la enfermedad de Crohn o la diabetes tipo 1. Por lo tanto, la detecci\u00f3n de MAP en la leche y el sacrificio de animales que excretan MAP pueden ayudar a mejorar la seguridad del consumidor.<\/p>\n

Esto se puede lograr detectando animales infectados en el reba\u00f1o con una prueba espec\u00edfica, sensible y econ\u00f3micamente viable. No obstante, ninguno de los m\u00e9todos de detecci\u00f3n de infecci\u00f3n por MAP disponibles actualmente es 100% sensible o espec\u00edfico<\/strong>. Por lo tanto, la identificaci\u00f3n de las vacas que excretan MAP debe basarse en una combinaci\u00f3n de m\u00e9todos.<\/p>\n

Uno de ellos consiste en la identificaci\u00f3n directa del pat\u00f3geno ya sea mediante el cultivo bacteriol\u00f3gico o bien a trav\u00e9s de la identificaci\u00f3n del material gen\u00e9tico. Con respecto a la detecci\u00f3n del material gen\u00e9tico, la hibridaci\u00f3n in situ<\/em> y la prueba de PCR<\/a> son las opciones m\u00e1s utilizadas en las muestras estudiadas, incluyendo leche, heces o tejidos. La secuenciaci\u00f3n del genoma completo de MAP ha permitido la identificaci\u00f3n de diferentes biomarcadores para el diagn\u00f3stico de la infecci\u00f3n, principalmente la fracci\u00f3n IS900.<\/p>\n

Seg\u00fan las recomendaciones de la Organizaci\u00f3n Mundial de la Salud, los casos de paratuberculosis deben ser registrados, aunque en algunos pa\u00edses, como Polonia no existe un programa de control de la enfermedad por lo que es posible el movimiento de animales infectados con MAP entre pa\u00edses.<\/p>\n

Los resultados parciales de evaluaciones de seroprevalencia en reba\u00f1os de ganado lechero polacos de los que se dispone, indican que existen diferencias significativas en t\u00e9rminos de incidencia de MAP en vacas dependiendo del tama\u00f1o y la ubicaci\u00f3n del reba\u00f1o, as\u00ed como del origen de los animales. Igualmente, se han observado diferencias considerables en la prevalencia de MAP en 13 pa\u00edses europeos.<\/p>\n

El objetivo de un estudio realizado en Polonia (Szteyn et al<\/em>., 2020) fue comparar dos m\u00e9todos de detecci\u00f3n de MAP: aislamiento directo de ADN y cultivo en muestras de leche individuales y agrupadas. Tambi\u00e9n se determin\u00f3 la frecuencia de aparici\u00f3n y diferenciaci\u00f3n de tipos de MAP aislados de muestras de leche de un reba\u00f1o de baja seroprevalencia<\/strong>.<\/p>\n

La investigaci\u00f3n se llev\u00f3 a cabo en un reba\u00f1o de vacas lecheras cruzadas en un \u00e1rea con paratuberculosis end\u00e9mica (\u017bu\u0142awy Wi\u015blane en la parte norte de Polonia). La mayor\u00eda de los animales (72%) del reba\u00f1o fueron importados; el 28% restante se crio en la granja. Se recogieron muestras de sangre (10 ml) y leche (100 ml) de 321 vacas de al menos 2 a\u00f1os de edad y se realiz\u00f3 la prueba ELISA de paratuberculosis.<\/p>\n

Seg\u00fan los resultados de dicha prueba, las muestras de leche se dividieron en dos grupos:<\/p>\n

    \n
  1. Muestras de animales seropositivos (11 muestras individuales)<\/li>\n
  2. Muestras de animales seronegativos (se combinaron en grupos de 5, lo que dio como resultado 62 muestras agrupadas)<\/li>\n<\/ol>\n

    Las muestras de leche se analizaron para determinar la presencia de MAP (por el m\u00e9todo de cultivo) y de la secuencia IS900 caracter\u00edstica de MAP (por aislamiento directo de material gen\u00e9tico de la leche).<\/p>\n

    Se detectaron m\u00e1s resultados positivos mediante cultivo<\/h2>\n

    Las pruebas de suero animal indicaron que la seroprevalencia del reba\u00f1o para la paratuberculosis era de un 3.43%<\/strong>. Se observ\u00f3 la presencia de colonias sospechosas por el m\u00e9todo de cultivo en el 100% de las muestras individuales y en el 56.4% de las muestras combinadas.<\/p>\n

    Posteriormente se realiz\u00f3 una PCR que confirm\u00f3 la presencia del fragmento IS900 en el 63.6% de las muestras de leche individuales y en el 24.1% de las combinadas<\/strong>. Por otra parte, la presencia de IS900 en el material gen\u00e9tico aislado directamente de las muestras se confirm\u00f3 en el 100% de las muestras individuales y en el 20.9% de las muestras combinadas.<\/p>\n

    As\u00ed pues, para las muestras de leche combinadas, se detectaron m\u00e1s resultados positivos mediante cultivo que mediante aislamiento directo de ADN (24.1% y 20.9% respectivamente)<\/strong>. Estos resultados son comparables a los de otros estudios. Sin embargo, en otras investigaciones se detectaron m\u00e1s muestras positivas con PCR. La evaluaci\u00f3n previa de los m\u00e9todos utilizados en este estudio revel\u00f3 una sensibilidad de 63.6% para el cultivo y de 75.0% para la PCR, y especificidades de 89.4 y 74.3%, respectivamente.<\/p>\n

    Identificaci\u00f3n y determinaci\u00f3n del tipo de MAP<\/h2>\n

    Dado que puede haber diferentes tipos de MAP responsables de la infecci\u00f3n, al desarrollar una estrategia para detectar vacas infectadas con MAP, se debe prestar atenci\u00f3n al origen de los animales. Se puede identificar y determinar el tipo de Mycobacterium avium<\/em> ssp. paratuberculosis<\/em> mediante diferentes t\u00e9cnicas.<\/p>\n

    En este estudio se utilizaron dos m\u00e9todos para ello: una PCR multiplex y una PCR-REA. Ambos m\u00e9todos indicaron la presencia de dos tipos de MAP: tipo C (que se a\u00edsla principalmente en bovinos) y tipo S (que se a\u00edsla principalmente en ovino). El tipo C estuvo presente en el 89.1% de las muestras de leche y solo el 10.9% de las cepas se identificaron como tipo S<\/strong>, resultados que se corresponden con investigaciones previas que mostraron que la mayor\u00eda de las cepas aisladas de reba\u00f1os de ganado en Europa eran del tipo C.<\/p>\n

    La detecci\u00f3n de cepas de MAP genot\u00edpicamente diferentes en un reba\u00f1o sugiere la existencia de diferentes fuentes de infecci\u00f3n por lo que puede ayudar a rastrear la fuente de dicha infecci\u00f3n<\/strong>.<\/p>\n

    Por otra parte, el tipo S se detect\u00f3 solo en el material gen\u00e9tico aislado directamente de las muestras de leche ya que es dif\u00edcil hacerlo crecer en un cultivo para las pruebas de identificaci\u00f3n, por lo que se recomienda el uso de ADN aislado directamente de las muestras de leche con m\u00e9todos basados en PCR.<\/p>\n

    Conclusi\u00f3n<\/h2>\n

    La informaci\u00f3n sobre los tipos de MAP que se encuentran en reba\u00f1os con baja seroprevalencia puede ayudar a determinar el origen del pat\u00f3geno, lo cual es importante si hay animales de diferentes regiones o pa\u00edses en el reba\u00f1o.<\/p>\n

    Se recomienda utilizar el material gen\u00e9tico aislado directamente de muestras de leche combinadas para conseguir un diagn\u00f3stico r\u00e1pido, identificar los tipos de MAP y hacer un seguimiento de la infecci\u00f3n, sin la necesidad de secuenciar todo el genoma<\/strong>.<\/p>\n

    Referencia<\/strong><\/p>\n

    Joanna Szteyn, Agnieszka Wiszniewska-\u0141aszczych, Joanna Wojtacka, Beata Wysok, and Katarzyna Liedke. Short communication: Occurrence and differentiation of Mycobacterium avium ssp. paratuberculosis (MAP) strains from milk of cows from herd with low prevalence of MAP. 2020. J. Dairy Sci<\/a>. 103:8526\u20138529.<\/p>\n

    \u00a9 2020 Dairy Knowledge Center. All Rights Reserved.<\/strong><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

    Maria Villagrasa & Nuria Garcia La paratuberculosis bovina, tambi\u00e9n conocida como enfermedad de Johne, es una patolog\u00eda causada por la bacteria Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP), que se caracteriza por una lesi\u00f3n intestinal cr\u00f3nica. 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